Stemcell Lymphoprep™淋巴細胞分離液500ml
Stemcell 07851 Lymphoprep™淋巴細胞分離液500ml，產(chǎn)品簡介：產(chǎn)品品牌：Stemcell產(chǎn)品貨號：07851產(chǎn)品名稱：Lymphoprep™淋巴細胞分離液產(chǎn)品規(guī)格：500mlStemcell Lymphoprep™淋巴細胞分離液500ml
Stemcell 07851 Lymphoprep™淋巴細胞分離液500ml
STEMCELL從事干細胞、免疫學(xué)、癌癥、再生醫(yī)學(xué)和細胞治療研究的科學(xué)家提供高質(zhì)量的細胞培養(yǎng)基、細胞分離技術(shù)、儀器以及配套產(chǎn)品。
Stemcell 07851 Lymphoprep™淋巴細胞分離液500ml，產(chǎn)品簡介：
產(chǎn)品品牌：Stemcell
產(chǎn)品貨號：07851
產(chǎn)品名稱：Lymphoprep™淋巴細胞分離液
產(chǎn)品規(guī)格：500ml
Stemcell Lymphoprep™淋巴細胞分離液500ml
產(chǎn)品說明：
Lymphoprep是一種無菌、內(nèi)毒素含量低的即用型分離液，是目前國內(nèi)外分離正常人或外周血單個核細胞的常用方法，具有與昂貴的GE公司的PLUS或PREMIUM分離液同樣的指標。
應(yīng)用推薦:
從外周血、臍帶血中分離單個核細胞
工作原理：
PBMC與血液中的其他成分存在密度差異，利用密度在1.077±0.001g/ml之間而且近于等滲的LymphoprepTM溶液作密度梯度離心時，紅細胞和粒細胞由于密度大，故沉于分離液底部。PBMC密度稍低于分離液，故位于分離液界面上，獲得PBMC。LymphoprepTM分離液含有多糖（polysacccharide）,多糖能粘附在細胞表面，使紅細胞和粒細胞聚集下沉，但它對淋巴細胞的活性和紅細胞和粒細胞進一步分離有負面影響。
注意事項:
該分離液僅適用于人體的外周血液，不適用于動物
使用該分離液時，需將待分離的血液用生理鹽水做等體積的稀釋
分離液的保存應(yīng)置于無菌環(huán)境，并避光保存
詳細操作步驟見產(chǎn)品說明書
技術(shù)參數(shù)
成分: 泛影葡an鈉(Sodium diatrizoate): 9.1% (w/v); 多糖: 5.7% (w/v)
密度: 1.077±0.001g/ml
滲透性: 290±15mOsm
內(nèi)毒素含量:<1.0EU/ml
分離所得PBMC中紅細胞的含量: 整個細胞數(shù)目的3-10%。
操作步驟(僅供參考)
第一步、
在含有抗凝劑(EDTA、heparin、或ACD) 的管子內(nèi)收集血液，或者用去纖維蛋白的血液。此處抗凝劑的選擇取決于得到淋巴細胞以后，后續(xù)實驗的要求，一般選取EDTA即可。
第二步、
用等體積的0.9%的NaCI溶液 (即生理鹽水)稀釋血液。
第三步、
在12-15ml的離心管內(nèi)，將6ml稀釋后的血液鋪在3ml分離介質(zhì)Lymphoprep上。
此處鋪層可以采用從上面鋪，或從下面鋪兩種方法。鋪層的關(guān)鍵是不能讓血液和分離液混在一起，要界面分層清晰。
第四步、
在室溫下——20攝氏度左右，用水平轉(zhuǎn)子，800g的離心力，離心20分鐘。(如果血液存放時間超過2小時——從人體抽出算起，離心時間延長為30分鐘)。
第五步、
離心前和離心后，離心管內(nèi)液體分層如下圖所示。
離心后，離心管內(nèi)位于血液和分離液界面處的明顯的一層即為淋巴細胞層。
用移液管直接吸取淋巴細胞層，注意，不要去除上面的血液層，而是直接吸取。移至另一離心管中，
第六步、
用大約2倍體積的0.9%的NaCl溶液(生理鹽水) 稀釋收集到的淋巴細胞，在250g-300g的離心力下，離心10分鐘，(此處在加上稀釋液后的體積在15ml離心管內(nèi)不宜超過5-6ml，體積過大，會降低淋巴細胞的產(chǎn)率)，收集沉淀，即得到所需的人外周血單個核細胞，即可用于后續(xù)的實驗。
Stemcell Lymphoprep™淋巴細胞分離液500ml
